ดีเอ็นเอ รีคอมบิแนนท์ DNA เป็นโมเลกุล ที่เกิดจากเทคนิคการรวมตัวของยีนในห้องปฏิบัติการ เพื่อรวมสารพันธุกรรมจากแหล่งต่างๆ เป็นไปได้เพราะโมเลกุล ดีเอ็นเอ ของสิ่งมีชีวิตทั้งหมด มีโครงสร้างทางเคมีเหมือนกันและแตกต่างกันในลำดับนิวคลีโอไทด์ภายในเท่านั้น การสร้าง การโคลนโมเลกุลเป็นกระบวนการทางห้องปฏิบัติ การที่ใช้ในการสร้างดีเอ็นเอลูกผสม เป็นหนึ่งในสองวิธีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายมากที่สุด ร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส PCR
ซึ่งช่วยให้คุณควบคุมการจำลองลำดับ DNA ที่เลือกโดยผู้ทดลองได้ มีความแตกต่างพื้นฐาน 2 ประการระหว่างวิธีดีเอ็นเอลูกผสม หนึ่งคือการโคลนโมเลกุลนั้นเกี่ยวข้องกับ การจำลองแบบในเซลล์ที่มีชีวิต ในขณะที่ PCR เกี่ยวข้องกับในหลอดทดลอง ความแตกต่างอีกประการหนึ่งคือวิธีแรกช่วยให้สามารถตัดและวางลำดับดีเอ็นเอได้ ในขณะที่วิธีที่สองได้รับการปรับปรุง โดยการคัดลอกลำดับที่มีอยู่ เวกเตอร์ดีเอ็นเอ การได้รับ DNA รีคอมบิแนนท์ต้องใช้เวกเตอร์การโคลนนิ่ง
ซึ่งมันได้มาจากพลาสมิดหรือไวรัส และเป็นส่วนที่ค่อนข้างเล็ก การเลือกเวกเตอร์สำหรับการโคลนโมเลกุล ขึ้นอยู่กับการเลือกสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ ขนาดของดีเอ็นเอที่จะโคลน และการแสดงโมเลกุลแปลกปลอมหรือไม่ เซ็กเมนต์สามารถรวมกันได้โดยใช้วิธีการต่างๆ เช่น การโคลนนิ่งของเอนไซม์จำกัด ลิเกสหรือการประกอบกิบสัน โคลนนิ่ง ในโปรโตคอลมาตรฐาน การโคลนมีเจ็ดขั้นตอน การเลือกสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์และเวกเตอร์โคลน
การได้รับเวกเตอร์ดีเอ็นเอ การก่อตัวของ DNA โคลน การสร้างดีเอ็นเอลูกผสม การแนะนำเข้าสู่สิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ การคัดเลือกสิ่งมีชีวิตที่มีมัน การคัดเลือกโคลนที่มีการแทรก DNA ที่ต้องการและคุณสมบัติทางชีวภาพ หลังการปลูกถ่ายไปยังสิ่งมีชีวิตที่เป็นเจ้าบ้าน โมเลกุลแปลกปลอมที่มีอยู่ในโครงสร้างลูกผสม อาจแสดงออกหรือไม่ก็ได้ การแสดงออกจำเป็นต้องมี การปรับโครงสร้างใหม่ของยีน เพื่อรวมลำดับที่จำเป็นสำหรับการผลิตดีเอ็นเอ
ซึ่งใช้โดยอุปกรณ์แปลของโฮสต์ มันทำงานอย่างไร ดีเอ็นเอลูกผสมทำงานเมื่อเซลล์เจ้าบ้านแสดงโปรตีนจากยีนลูกผสม การแสดงออกขึ้นอยู่กับยีน โดยรอบด้วยชุดสัญญาณที่ให้คำแนะนำ สำหรับการถอดความ ได้แก่ โปรโมเตอร์ การจับไรโบโซม และเทอร์มิเนเตอร์ ปัญหาจะเกิดขึ้นหากยีนมีอินตรอน หรือสัญญาณที่ทำหน้าที่เป็นตัวยุติสำหรับโฮสต์แบคทีเรีย สิ่งนี้นำไปสู่การเลิกจ้างก่อนกำหนด โปรตีนลูกผสมอาจถูกแปรรูป พับหรือเสื่อมสภาพอย่างไม่เหมาะสม
การผลิตในระบบยูคาริโอต มักเกิดขึ้นในยีสต์และเชื้อราที่เป็นเส้นใย การใช้กรงสัตว์ทำได้ยากเนื่องจากหลายๆตัว ต้องการพื้นผิวรองรับที่แข็งแรง คุณสมบัติของสิ่งมีชีวิต สิ่งมีชีวิตที่มีโมเลกุล DNA รีคอมบิแนนท์มีฟีโนไทป์ปกติอย่างเห็นได้ชัด รูปลักษณ์ พฤติกรรม และการเผาผลาญมักจะไม่เปลี่ยนแปลง วิธีเดียวที่จะแสดงให้เห็นว่ามีลำดับรีคอมบิแนนท์คือ การตรวจสอบดีเอ็นเอด้วยตัวมันเอง โดยใช้การทดสอบปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
ในบางกรณี DNA รีคอมบิแนนท์อาจมีผลร้าย สิ่งนี้สามารถเกิดขึ้นได้เมื่อชิ้นส่วน ที่มีโปรโมเตอร์ที่ใช้งานอยู่ถัดจากยีนเซลล์โฮสต์ ที่เงียบก่อนหน้านี้ การใช้งาน เทคโนโลยี รีคอมบิแนนท์ DNA ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านเทคโนโลยีชีวภาพ การแพทย์และการวิจัย โปรตีนและผลิตภัณฑ์อื่นๆ ของบริษัทสามารถพบได้ในร้านขายยาตะวันตก คลินิกสัตวแพทย์ คลินิกแพทย์ ห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ หรือทางชีววิทยาเกือบทุกแห่ง
การใช้งานทั่วไปส่วนใหญ่ อยู่ในการวิจัยขั้นพื้นฐาน ซึ่งเทคโนโลยีมีความจำเป็นต่องานปัจจุบัน ส่วนใหญ่ในวิทยาศาสตร์ชีวภาพ และชีวการแพทย์ รีคอมบิแนนท์ DNA ใช้เพื่อระบุ ทำแผนที่และจัดลำดับยีน กำหนดหน้าที่ของยีน โพรบ rDNA ใช้ในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนในเซลล์เดียว และในเนื้อเยื่อของสิ่งมีชีวิตทั้งหมด โปรตีนลูกผสมถูกใช้เป็นรีเอเจนต์ ในการทดลองในห้องปฏิบัติการ ตัวอย่างเฉพาะบางส่วนได้รับด้านล่าง
ไคโมซินลูกผสม พบในอะโบมาซัม ไคโมซินเป็นเอนไซม์ที่จำเป็นในการทำชีส เป็นวัตถุเจือปนอาหารดัดแปลงพันธุกรรมชนิดแรก ที่ใช้ในอุตสาหกรรม เอนไซม์รีคอมบิแนนท์ที่ผลิตขึ้น ทางจุลชีววิทยามีโครงสร้างเหมือนกับเอ็นไซม์ที่ได้จากลูกวัวจะมีต้นทุนน้อยกว่า และผลิตได้ในปริมาณมาก อินซูลินของมนุษย์แบบรีคอมบิแนนท์ อินซูลินที่ถูกแทนที่เกือบทั้งหมดที่ได้มาจากสัตว์ เช่น สุกรและโค สำหรับการรักษาโรคเบาหวานขึ้นอยู่กับอินซูลิน
อินซูลินแบบรีคอมบิแนนท์ถูกสังเคราะห์ โดยการนำยีนอินซูลินของมนุษย์เข้าสู่แบคทีเรียในสกุล เอเทอริเชียหรือยีสต์ ฮอร์โมนการเจริญเติบโต มีการกำหนดไว้สำหรับผู้ป่วยที่ต่อมใต้สมอง ไม่สร้างฮอร์โมนการเจริญเติบโตเพียงพอที่จะรักษาการพัฒนาตามปกติ ก่อนที่ฮอร์โมนการเจริญเติบโตแบบรีคอมบิแนนท์จะใช้ได้นั้น ได้มาจากต่อมใต้สมองของซากศพ การปฏิบัติที่ไม่ปลอดภัยนี้ทำให้ผู้ป่วยบางรายเกิดโรค เครทซ์เฟลดต์ ยาคอบ
ปัจจัยการแข็งตัวของเลือดรีคอมบิแนนท์ นี่คือโปรตีนที่ทำให้เลือดจับตัวเป็นลิ่มเลือด สำหรับผู้ป่วยที่เป็นโรคฮีโมฟีเลียที่มีภาวะเลือดออกผิดปกติ พวกเขาไม่สามารถสร้างปัจจัย VIII ในปริมาณที่เพียงพอ ก่อนการพัฒนาของปัจจัยลูกผสม VIII โปรตีนถูกสร้างขึ้นโดยการประมวลผลเลือดมนุษย์ จำนวนมากจากผู้ให้หลายราย ซึ่งมีความเสี่ยงสูงที่จะแพร่โรคติดต่อ การวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี
วิธีการที่ใช้กันทั่วไปทั้ง 3 วิธีในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีได้รับการพัฒนาโดยใช้ดีเอ็นเอลูกผสม การทดสอบแอนติบอดีใช้โปรตีนของเธอ ตรวจพบการมีอยู่ของสารพันธุกรรมเอชไอวี โดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสการถอดรหัสย้อนกลับ การพัฒนาแบบทดสอบเกิดขึ้นได้ โดยการโคลนโมเลกุลและการจัดลำดับจีโนมของเอชไอวี
อ่านต่อได้ที่ >> แมว สาเหตุที่เป็นไปได้ของภาวะไตวายในแมว
